上海遠(yuǎn)慕生物科技專(zhuān)業(yè)提供大鼠ELISA試劑盒的說(shuō)明使用，價(jià)格，規(guī)格，型號(hào)，用途，性能等資訊，本司專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒，酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標(biāo)檢測(cè)試劑盒，培養(yǎng)基，抗體，動(dòng)物血清，標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品，化學(xué)試劑，實(shí)驗(yàn)耗材，為客戶(hù)提供免費(fèi)代測(cè)ELISA試劑盒服務(wù)，一周內(nèi)出結(jié)果，咨詢(xún)！

    中文名：大鼠ELISA試劑盒

    別名：大鼠ELISA Kit

    供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

    規(guī)格：48t/96t

    保存：2-8℃

    有效期：6個(gè)月

    范圍：科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷。

    特點(diǎn)：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。

    用途：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。

    檢測(cè)種屬：大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。

    樣本類(lèi)型：適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞上清、組織勻漿等樣本。

液體類(lèi)標(biāo)本：

    包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

    1）血漿：

    應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    2）血清：

    室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    3）組織標(biāo)本：

    切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

    4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

    檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    5）尿液：

    用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

   嚴(yán)格注明：

    1. 用戶(hù)在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。

    2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。

    3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。

    4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液或、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。

    5. 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒性能：

    1.靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

    2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

    3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟：

    1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

    2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

    3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。

    4.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

    5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

    6.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

    7.每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

    8.取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

    9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

建議使用的實(shí)驗(yàn)方案：

    6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到精確的結(jié)果。

    引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：

    1）試劑因素；

    2）操作因素。

    3）標(biāo)本因素；

 大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)：

    1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未

    用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

    2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

    3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使排槍加樣。

    4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)3算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

    5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

    6. 底物請(qǐng)避光保存。

    7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

    8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

    9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

    10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

    結(jié)果判斷與分析：

    1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。

    2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的ICAM-1/CD54標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的ICAM-1/CD54含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

    3、檢測(cè)值范圍：0-80ng/ml

    4、敏感度：0.1ng/ml

    大鼠ELISA酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒適用領(lǐng)域：

    1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位

    2.研究抗酶抗體的合成

    3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)

    4.定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份